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Opinião



                 A detecção molecular, e não a incubação prolongada da cultura,
                             contribui para o diagnóstico de infecção fúngica                                (*)



                        Giannina Ricci, PhD - Consultora em Biologia Molecular
                        Doutorado (CAPES/DAAD) Instituto de Medicina Tropical, Universidade de Tübingen, Alemanha e  Depto. de Patologia/UNIFESP.
                        Pós-doutorado: Disciplina de Infectologia, Departamento de Medicina – LEMI/UNIFESP.
                        Centro de Pesquisa em Biologia Molecular Dr. Ivo Ricci
                        info@biomolricci.com
                        biomolricci23@gmail.com

            (*)   Texto  extraído  e  traduzido  livremente  do  artigo  científico  intitulado   prospectivamente,  a  análise  desse  alvo  molecular  por  PCR  demonstrou  seu
         “Molecular detection, not extended culture incubation, contributes to diagnosis of   valor para o diagnóstico de IFs negativas à microscopia. A PCR da região ITS
         fungal infection” de Zhu et al. (2021). BMC Infect Dis.,21(1):1159.  foi implementada no laboratório de Zhu e cols. em 2013, com o estabelecimento
            A expansão contínua da população de pacientes imunocomprometidos, como   de  um  protocolo  que  exige  dos  médicos  infectologistas  a  solicitação  do  teste
         resultado  da adoção  generalizada  de terapias  imunossupressoras agressivas e de   especialmente quando uma amostra de uma fonte estéril é negativa para cultura de
         novos  medicamentos  modificadoras  do  sistema  imunológico,  está  associada  ao   fungos e a suspeita de IF é alta. O objetivo do estudo foi revisar a experiência dos
         aumento das infecções fúngicas invasivas (IFIs) em número e gravidade. A taxa de   autores com a cultura fúngica para determinar o tempo ideal de incubação e revisar
         mortalidade em 12 semanas de pacientes com IFIs foi relatada como sendo de até   a experiência com a PCR da região ITS-rRNA para o diagnóstico de infecções
         46,7% para receptores de transplante de células-tronco hematopoiéticas adultos e   fúngicas (IFs) com cultura negativa.
         29,6% para pacientes de transplante de órgãos sólidos. Portanto, o início imediato   Segundo os autores, o Manual de Microbiologia Clínica recomenda que as
         da terapia antifúngica é a intervenção mais importante para diminuir a mortalidade   culturas que rastreiam Candida spp precisam ser incubadas por no máximo 72 h, as
         em pacientes com IFIs.                                         culturas de triagem para dermatófitos, por apenas 8 dias e a triagem de culturas para
            Apesar de sua baixa sensibilidade, a cultura continua sendo um dos principais   todos os patógenos deve ser realizada por 4 semanas, uma recomendação universal
         métodos para o diagnóstico e o tratamento de infecções fúngicas (IFs), uma vez que   comumente baseada na experiência empírica, a fim de maximizar a recuperação
         identifica o agente etiológico em nível de gênero e espécie, além de possibilitar a   de espécies de crescimento lento e em virtude da necessidade de detecção de
         realização de testes de suscetibilidade. Contudo, a recuperação de patógenos fúngicos   uma ampla variedade de organismos em pacientes imunocomprometidos. Como
         depende  de  vários  fatores,  incluindo  qualidade  da  amostra,  coleta  e  transporte   resultado, a incubação de culturas por 4 semanas é uma prática comum na
         apropriados da amostra e condição e tempo ideais de incubação. Alguns estudos   maioria dos laboratórios de microbiologia clínica. Porém, o tempo de incubação
         investigaram o tempo de incubação da cultura e geraram resultados mistos. Morris   estendido não apenas atrasa a notificação de resultados de cultura negativos, mas
         e col. revisaram mais de 2.700 culturas clínicas consecutivas e determinaram que   também aumenta a chance de recuperar um contaminante. No estudo, os autores
         98% dos isolados fúngicos foram detectados no 14  dia. Labarca e cols. avaliaram   salientaram  que  apenas  7  amostras  apresentaram  crescimento  de  fungos  após
                                              º
         cerca de 4.000 culturas fúngicas positivas e concluíram que isolados recuperados   14 dias de incubação e que em todos os casos, os organismos recuperados pela
         durante  a  4ª  semana  raramente  eram  clinicamente  significativos.  O  estudo  de   cultura foram considerados clinicamente irrelevantes, sendo 3 deles isolados de
         Bosshard  sugeriu  que  2  semanas  de  incubação  eram  suficientes  para  avaliação   Penicillium spp., de significado clínico questionável após recuperação durante a
         de  não  dermatófitos,  enquanto  uma  incubação  de  4  semanas  era  necessária  para   incubação estendida.
         recuperação de dermatófitos.                                      Segundo  o  artigo,  a  PCR  (ITS)  seguida  de  sequenciamento  tornou-se  o
            Para superar a baixa sensibilidade da cultura fúngica, métodos diagnósticos   método, independente de cultura, de escolha devido à sua vantagem de permitir
         adicionais,  como  os  testes  para  antígenos  e  biomarcadores  fúngicos,  são   maior  sensibilidade  e  rápida  identificação  de  fungos  em  espécimes  clínicos.
         frequentemente usados além da cultura para ajudar a estabelecer um diagnóstico.   Conforme ressaltado pelos autores, um estudo recente demonstrou que o método
         Ensaios baseados em PCR visando várias regiões genéticas foram desenvolvidos   molecular  apresentou  sensibilidade  de  96,6%  e  especificidade  de  98,2%  para
         para melhorar o rendimento diagnóstico, mas são principalmente restritos às   detecção  de patógenos, diretamente de espécimes clínicos, com diagnóstico
         espécies de  Aspergillus  e  Candida. Em situações em que outros patógenos   conhecido e rendimento diagnóstico de 71,3% em pacientes com IFIs comprovadas
         oportunistas não podem ser descartados, a detecção molecular de uma ampla   com  base  na  Organização  Europeia  para  Pesquisa  e  Tratamento  de  Câncer/IFIs.
         gama de patógenos é desejada. A PCR da região do espaçador transcrito interno   Por  fim,  concluem  que  estender  a  incubação  da  cultura  além  de  2  semanas  não
         do  RNA  ribossomal  (ITS-rRNA),  considerado  o  alvo  molecular  universal  para   gerou resultados clinicamente relevantes e afirmam que quando a cultura falhou
         fungos,  em  combinação  com  o  sequenciamento  de  DNA  é  promissora  para  a   no  diagnóstico  laboratorial,  a  PCR  e  o  sequenciamento  produziram  resultados
         detecção e identificação de fungos em amostras clínicas. Em um estudo realizado   clinicamente significativos.




                                                                                      Por que o ser humano tem
                                                                                     tanta dificuldade de mudar?

                                                                                  Estudo brasileiro analisa as características que dificultam o
                                                                                         ser humano de lidar bem com mudanças
                                                                             Mudar é essencial para se adaptar a novos cenários, no entanto, essa nem sempre
                                                                          é uma tarefa fácil para a maioria das pessoas e esse tipo de resistência, pode não ter
                                                                          ligação apenas com saudosismo, mas também com características neurais. É o que
                                                                          aponta um novo estudo intitulado “Doenças do lobo frontotemporal: Dificuldades de
                                                                          aprendizado”, publicado na revista científica “Cuadernos de Educación y Desarrollo”.
                                                                             Dr.  Bora  Kostic,  Médico,  Cirurgião  Plástico  e  pesquisador  do  Centro  de
                                                                          Pesquisas e Análises Hieráclito - CPAH, um dos autores do estudo, juntamente
                                                                          com o Pós PhD em neurociências, Dr. Fabiano de Abreu e o Médico Ortopedista
                                                                          Dr. Luiz Felipe, explica que aspectos biológicos podem interferir na compreensão
                                                                          do ser humano.
                                                                             “O ser humano por sua essência já possui certa dificuldade na assimilação de
                                                                          novas opiniões [...],, mas a dificuldade de aceitar uma realidade pode se dar por
                                                                          meio de disfunções” Afirma no estudo.
                                                                             Por que mudanças de comportamento podem ser tão difíceis? Existem diversas
                                                                          características  que  podem  influenciar  a  resistência  a  alterações  em  rotinas,
                                                                          comportamentos e hábitos, como genética, ambiente e até mesmo patologias.
                                                                             “A genética influencia diretamente a habilidade cognitiva do ser humano, mas
                                                                          também  podem  ser  influenciadas  por  fatores  externos  como  trauma  ambiental,
                                                                          problemas  no  nascimento,  deficiências  nutricionais  e  necessidades  sociais  [...]
                                                                          As redes sociais e a internet são de grande impacto na vida cotidiana, onde as
                                                                          pessoas tendem a se tornar dependentes dessas tecnologias para estarem incluídos
                                                                          na sociedade”.  Créditos: Dr. Bora Kostic, Dr. Fabiano de Abreu e Dr. Luiz Felipe (MF Press Global)
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